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植物總酚檢測試劑盒說明書
更新時間:2020-03-16 點擊量:2101

植物總酚檢測試劑盒說明書

分光光度法

產品內容:

提取液:60%乙醇,自備。

試劑一:液體6mL×1 瓶,4保存。

試劑二:液體15mL×1 瓶,4保存。

產品說明:

植物酚類物質具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營養價值和醫療保健作用而廣泛應用于化妝品、食品、醫藥等領域。

在堿性條件下,酚類物質將鎢鉬酸還原,產生藍色化合物,在760nm 處有特征吸收峰,測760nm 處的吸光值,即可得樣品總酚含量。

儀器設備(自備):

烘箱、粉碎儀、40目篩、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿。

操作步驟:

  • 總酚提取: 

將樣本烘干至恒重,粉碎,過40目篩之后,稱取約0.1g,加入2.5mL提取液,用超聲提取法進行提取,超聲功率300W,破碎5秒,間歇8秒,60,提取30min12000rpm,25,離心10min,取上清,用提取液定容至2.5mL,待測。

 2、測定操作表:

 

對照管

測定管

樣本待測液(mL

0.05

0.05

試劑一(mL

 

0.25

混勻,室溫靜置2min

試劑二(mL

0.25

0.25

雙蒸水(mL

0.7

0.45

混勻,室溫靜置10 min,雙蒸水調零,波長760nm,1mL比色皿,

測定各管吸光度值(ΔA760=A測定-A對照)。

計算公式:

標準曲線:y=5.615x+0.0012R2=0.9994

總酚含量(mg/g組織)=(ΔA760-0.0012) ÷5.615×V反總÷V÷V樣總×W=8.905×(ΔA760-0.0012) ÷W

V 樣總:加入提取液體體積,2.5mLV反總:反應總體積,1mL;V 樣:反應中樣品體,0.05mL;W:樣品質量,g。

注意事項:

  • OD 值大于0.8,樣品適當稀釋再測定,注意計算公式里乘以稀釋倍數。
  • 試劑一對皮膚有一定的刺激性,請操作時做好防護措施。

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